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高效液相色谱仪使用方法

  日期:2022-06-10 15:09:59  浏览量:269   移动端
导读:GX液相色谱仪只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非
GX液相色谱仪只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。

GX液相色谱仪使用步骤
1、过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.

2、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3、打开GX液相色谱仪工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。

4、进入GX液相色谱仪控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。

5、有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10ml/min。


6、调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。

7、设计走样方法。点击file,选取se-lect users and methods,可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击new method。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括:①进样前的稳流,一般2-5分钟;②基线归零;③进样阀的loading-inject转换;④走样时间,随不同的样品而不同。

8、进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。

9、关机时,先关计算机,再关GX液相色谱仪。

10、填写登记本,由负责人签字。

GX液相色谱仪使用价值
1、分离分析药物的组分含量:由于一种药剂常含有多组分,一次即可将各维生素B6、D1、A、E同时分离并定出含量。又如止痛药或退烧药也可用此法分离并测得各组分的含量。

2、药物生产中进行中间控制:生产KJ素时,首先要了解发酵液中的主体与付产物的存在情况。例如:青霉素、四环素、头孢子菌素、红霉素、柔红霉素、庆大霉素等的发酵产物,均可用C18柱和甲醇及缓冲液配制的流动相或用离子对法,分析主体及其收产物的含量。对普鲁卡因酰胺、茶碱等可进行主体含量的测定,对硝酸甘油可测定主体含量及其降解产物,以便保证药物的热量。

3、分析药物在体内的残量:这是近来研究新药效能很主要的内容之一,如冬凌草甲素是植物中的一组分,有效果,但是毒性大。测定其在血清中含量很重要,现在可用C18柱及甲醇水为流动相,测定处理后的血清样品,即可得到血中的含量。如磺胺类药品在血清及尿中含量也不允许太大,可用C18柱及酸性乙醇为流动相,测定含量后,则可估计Z合适的用药剂量。

4、测定药物在各种器官中的代谢产物,特别是研究药物的代谢产物在血清中存在的情况。如测血清中的酮酸及戊二酸。测尿中代谢产物更为方便,不需要繁锁的预处理。因为研究尿中的组分能鉴别病人的代谢功能,对病理研究或监床诊断均具有重要的参考价值。

GX液相色谱仪只要求样品能制成溶液,不受样品挥发性的限制,流动相可选择的范围宽,固定相的种类繁多,因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合,GX液相色谱仪所达到的高分辨率和高灵敏度,使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能,能够分离复杂相体中的微量成分。

GX液相色谱仪使用注意事项
GX液相色谱仪作为实验室常用的分析型仪器,上手比较快,但有五个操作细节容易被忽略。即使是经验丰富的老分析员也会犯错误,导致一些仪器故障。

1、GX液相色谱仪流动相不过滤因为尘埃或其它杂质会磨损柱塞、密封圈和单向阀,因此流动相Z好预先用0.2um或0.45um滤膜过滤后再使用。流动相的溶剂滤头要不定期清洗或更换。

2、GX液相色谱仪使用后没有及时清洗流动相中不应含有腐蚀性物质,含有缓冲盐的不应留在GX液相色谱仪系统内,由于蒸发或漏液,可能造成盐类晶体析出,会堵塞密封圈和单向阀。

3、GX液相色谱仪流动相走空泵工作时要防止流动相走空,否则泵空转也会磨损柱塞杆和密封圈,造成漏液故障。

4、GX液相色谱仪没有流动相流出,有无压力可能是泵内有空气,需要先排空,或使用注射器针筒抽出液体,还有可能性是密封圈磨损,需更换。

5、GX液相色谱仪压力和流量不稳可能是有气泡,或者是单向阀内有异物,需要卸下单向阀,放在10%甲醇水,或者异丙醇超声后再使用。

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